产品货号:
JN5055
中文名称:
2×Taq Plus MasterMix(含染料)
英文名称:
2×Taq Plus PCR Master Mix(Quick Load)
产品规格:
5mL|25mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本制品是将PCR反应所需的Taq Plus DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2以及反应缓冲液预先配制成2倍浓度的混合物。2×Taq Plus MasterMix专为DNA大片段PCR扩增反应优化,扩增长度增加,保真度好,扩增速度快,反应效率高,适合于扩增1~20kb长度的片段。使用时只需加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,大大地简化了操作过程,减少了PCR操作过程中的污染。使用本制品扩增得到的PCR产物具有3'端"A"突出,因此可直接克隆于T载体中。本制品含上样染料,经测试,染料的加入不影响PCR反应,在PCR反应完成后可直接电泳,节省时间。
- 可替代大部分2×Taq MasterMix的用途;
- 需高灵敏度的PCR扩增;
- 大片段PCR扩增反应(可达20kb)。
- 更高效:以λDNA为模板,扩增长度可达20kb。
- 更灵敏:比Taq酶扩增灵敏度更高。
- 稳定:反复冻融几十次,4℃放置30天,室温放置一周后,扩增性能不受影响。
- 快捷:PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配制。
- 便利:含上样染料,PCR反应后可直接电泳。
组分 | 5mL | 25mL |
2×Taq Plus MasterMix(含染料) | 5×1mL | 25×1mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:-20℃
经检测无外源核酸酶残留,qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。
使用本制品扩增得到的PCR产物具有3'端"A"突出,可直接克隆于T载体中。
- 需溶解完全后使用,防止离子浓度不均匀。
- 应根据实验目的选择合适的循环数,循环数过少,会造成扩增量不足。循环数过多,扩增量增加,但突变率会增加,并造成非特异性扩增。
- 根据引物Tm值设置合适的退火温度,退火温度过低,会造成非特性扩增。退火温度过高,可能扩增不到目的条带。
50μL扩增体系中,分别以100ng~0.1ng小鼠基因组DNA为模板,可很好地扩增出1.1kb DNA片段。
泳道M:DNA Ladder 2000;
泳道1:100ng;泳道2:10ng;
泳道3:1ng;泳道4:0.1ng。
- 常用反应体系
注:Mg2+终浓度为2mM。成分 用量 2×Taq Plus MasterMix(含染料) 25μL 上游引物 0.2~1.0μM(终浓度) 下游引物 0.2~1.0μM(终浓度) 模板 1~50ng(质粒)
10ng~1μg(基因组)ddH2O 至50μL - 常用PCR反应程序
- 当扩增片段<3K:
反应阶段 温度 时间 循环数 预变性 94℃ 90s 1 变性 94℃ 20s 30 退火 50~60℃ 20s 延伸 72℃ 1kb/60s 终延伸 72℃ 5min 1 保温 4℃ - 1 - 当扩增片段≥3K(推荐引物长度≥30bp):
反应阶段 温度 时间 循环数 预变性 94℃ 5min 1 变性 94℃ 5s 30 退火/延伸 68℃ 1kb/60s 终延伸 72℃ 5min 1 保温 4℃ - 1
- 当扩增片段<3K:
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